تست کواگولاز

تست کواگولاز

روش انجام تست کواگولاز اسلایدی:

1.یک قطره از پلاسما بر روی لام یا اسلاید شیشه‌ای خشک و تمیز قرار داده می‌شود.
یک قطره آب مقطر و یا سرم فیزیولوژی در نقطه مجزایی (به‌عنوان کنترل) گذارده می‌شود.
با یک لوپ و یا انس استریل مقداری از کلنی را در هر یک از قطرات فوق، امولوسیون می‌کنیم تا سوسپانسیون یکنواختی تهیه شود.

2.ازنظر تشکیل لخته در محل پلاسما و سوسپانسیون یکنواخت در محل کنترل بررسی می‌کنیم.

اگر تشکیل لخته در هر دونقطه انجام شود نشان‌دهنده اتواگلوتیناسیون ارگانیسم است و بایستی تست کواگولاز تکرار شود.

بررسی نتایج:

استافیلوکوک اورئوس موجب تجمع سریع و لخته قابل‌مشاهده‌ای در سطح لام می‌شود.

استافیلوکوک اپیدرمیس هیچ لخته‌ای را ایجاد نمی‌کند و سوسپانسیون در شکل یک محلول شیری‌رنگ صاف و یکنواخت باقی می‌ماند.

روش انجام تست کواگولاز لوله‌ای:

1.معرف تست کواگولاز را تهیه می‌کنیم. به‌این‌ترتیب که مقدار ۰٫۵ میلی‌لیتر از پلاسمای انسان یا خرگوش (حاوی ماده ضد انعقاد EDTA) را در لوله‌آزمایش پلاستیکی یا شیشه‌ای می‌ریزیم. این پلاسما در دمای یخچال برای ۱۰ روز و در دمای ۲۰- درجه برای چند ماه قابل نگهداری است.

2.پلاسما را به میزان ۱ به ۴ رقیق کرده و سوسپانسیونی از باکتری را در آن تهیه می‌کنیم.

3.این سوسپانسیون را برای ۴-۱ ساعت در دمای ۳۷-۳۵ درجه نگهداری کرده و ازنظر تشکیل لخته بررسی می‌کنیم. اگر در مدت ۴ ساعت، لخته تشکیل نشد برای یک‌شب در حرارت باقی می‌گذاریم.

ارگانیسم‌هایی که نتوانند پلاسما را در مدت ۲۴ ساعت لخته کنند به‌عنوان کواگولاز منفی در نظر گرفته می‌شوند.

بررسی نتایج:

استافیلوکوک اورئوس، پلاسما را در مدت ۲۴ ساعت لخته می‌کند اما استافیلوکوک اپیدرمیس حتی بعد از یک‌شب، توانایی لخته کردن پلاسما را ندارد.